Анализы пцр коронавирус кошек

Коронавирус кошек

Коронавирус кошек

От 60 до 80% кошек имели контакт, либо были заражены коронавирусом.

Коронавироз кошек – вирусное заболевание, вызываемое пока еще малоизученным вирусом семейства Coronaviridae. Различают два основных вида коронавироза – Коронавирусный энтерит и Коронавирусный инфекционный перитонит кошек. (Подробнее про вирусный перитонит: Статья в Энциклопедии «Шанс Био»)

Вирус может вызывать серьезные последствия у животных вплоть до летального исхода. Чаще всего коронавирусом заражаются молодые кошки, содержащиеся в питомниках.

Основной путь заражения – фекально-оральный, а для котят источником заражения становится их мать.

Коронавирус содержится в значительно высоком количестве в фекалиях зараженных особей. Сам процесс заражения происходит в момент вдыхания вируса, либо при его проглатывании. Коронавирус отличается устойчивостью, и очень легко распространяется, поэтому, даже находясь у лотка больного животного, здоровая кошка может заразиться. Вирулентность вируса высокая, поэтому для заражения достаточно небольшого его количества.

Механизм заражения.

Стойкость вируса впечатляет: он может сохранять свою жизнеспособность в окружающей среде до семи недель

Вирус проникает в организм через рот, после чего происходит поражение эпителиальных клеток тонкого кишечника. Далее иммунная система кошек начинает активно работать над борьбой с вирусом, и в большинстве случаев здоровое животное справляется с ним. При этом, вирус может находится в организме без признаков заболевания в течение нескольких месяцев.

Читайте также:  Названия окрасов бурманских кошек

Коронавирус кошек не передается котятам через плаценту, а маленькие особи заражаются от матери в момент, когда уровень защитных антител в молоке становится меньше, и тогда организм становится более чувствительным. Происходит это в среднем в возрасте 5-7 недель.

Опосредованный путь передачи (перенос инфекции на предметах одежды, сумках и т.д.) крайне невелик, но возможен в случае непосредственного ее загрязнения зараженными фекалиями.

Виды заболевания

Коронавирус кошек разделяют на два вида:

FCoV – кишечный вирус.

FIPV – вирус, вызывающий инфекционный перитонит кошек.

Оба вируса являются родственными по отношению друг к другу по антигенному составу, при этом FIPV является мутированным вирусом, который образуется в организме кошки после инфицирования кишечным вирусом под воздействием негативных факторов. Вирус FCoV практически безопасен для здоровья кошек, так как здоровый организм справляется самостоятельно с ним. А вот при мутировании кишечного вируса в FIPV и развитии инфекционного перитонита вероятность летального исхода равна почти 100%.

Несмотря на то, что оба вида вирусов имеют родственный состав, следует понимать, что коронавирусный энтерит и инфекционный перитонит – это абсолютно разные заболевания. Если кошка заболела кишечным вирусом FCoV, это не значит, что она заразится инфекционным перитонитом, и наоборот, FIPV не является осложнением FCoV.

Симптомы коронавироза

Коронавирусный энтерит чаще всего протекает без ярко выраженных признаков. Отмечают кишечные расстройства (диарея, возможно со слизью или примесью крови), что происходит из-за поражения клеток тонкого кишечника. Возможна потеря веса, исчезновение аппетита. Обычно симптомы не вызывают каких-либо опасений, а прогноз заболевания благоприятный, за исключением случаев снижения иммунитета, вторичного инфицирования, либо наличия сопутствующих заболеваний в анамнезе.

Инфекционный перитонит кошек. (Подробнее про вирусный перитонит: Статья в Энциклопедии «Шанс Био») Несмотря на то, что коронавирус мало опасен для животного, при определенных условиях он может мутировать в FIPV, и закончиться смертью животного. Основные признаки Инфекционного перитонита: напряжённость брюшной стенки и болезненность при пальпации живота; повышение температуры тела, быстрая потеря веса, снижение активности, накопление жидкости в брюшной полости (асцит), может наблюдаться желтушность слизистых оболочек, частое затрудненное дыхание.

Как правило, вирусный перитонит кошек в течение короткого времени (от нескольких недель до нескольких месяцев) приводит к летальному исходу. Однако при сильном иммунитете в некоторых случаях болезнь может перейти в стадию ремиссии (хроническое течение, при котором животное удовлетворительно себя чувствует). В этих случаях инфекция не выходит за пределы кишечных лимфатических узлов, здесь вирус подавляется и дальше не распространяется. Либо, процесс может перейти в гранулематозную стадию без выпота, так называемый, сухой перитонит. Заболевание при хроническом течении может давать рецидивы. Это объясняет, почему у пожилых кошек может развиваться FIP.

Диагностика коронавируса.

Лаборатория «Шанс Био» делает несколько исследований на коронавирусы кошек.

051 Антитела к коронавирусной инфекции кошек (ИФА)

Цель исследования: полуколичественное определение титра циркулирующих специфических антител класса G (Ig G) к коронавирусу кошек в сыворотке и плазме. Метод определения: модифицированный иммуноферментный анализ (dot ELISA) Материал: — кровь в пробирку для б/х или пробирку с ЭДТА 1-1,5 мл; — сыворотка/плазма 100 мкл; гемолиз не влияет Хранение пробы: — пробы цельной крови допустимо хранить одни сутки в холодильнике, — сыворотку/плазму – до 3-х дней в холодильнике;

007 Вирусный перитонит кошек (FIP) (ПЦР)

Цель исследования: выявление РНК коронавируса Требования к пробе: — венозная кровь в пробирке с антикоагулянтом ЭДТА — мин. объем — 1 мл. Плазму и эритроциты не разделять! — асцитная жидкость в стерильном контейнере без антикоагулянта- мин.объем — 0,5 мл — асцитная жидкость в стерильной пробирке с антикоагулянтом ЭДТА — мин.объем — 1 мл Будьте внимательны: — кровь с гепарином не подходит для исследований методом ПЦР! — кровь в пробирке для биохимии

Метод исследования: биохимический анализ выпотной жидкости Определяемые показатели: альбумин, глобулин, амилаза, холестерин, глюкоза, триглицериды, липаза, общий белок Требования к пробам: Выпотная (асцитная) жидкость может быть доставлена в лабораторию непосредственно в шприце или в пробирке для биохимии без активаторов свертывания. Минимальный объем — 0,5- 1 мл Хранение пробы: при +2-+8⁰С

801 Цитология выпотов, экссудатов/транссудатов (биохимия+ цитология)

141 Соотношение альбумин/глобулин (выпотная жидкость)

Метод исследования: биохимический анализ выпотной жидкости Требования к пробам: Выпотная (асцитная) жидкость может быть доставлена в лабораторию непосредственно в шприце или в пробирке для биохимии без активаторов свертывания. Минимальный объем — 0,5 мл Хранение пробы: при +2-+8⁰С

Кроме того, необходимо проведение

Профилактика инфицирования коронавирусом

Борьба с вирусным перитонитом должна быть направлена прежде всего на его профилактику, в основном, предотвращение заражения котят кишечной коронавирусной инфекцией. Для этого требуется изоляция беременных кошек за 2 недели до родов, отлучение котят в возрасте 5 недель от матери и изоляция от остальных кошек; а в возрасте 6 месяцев — подтверждение лабораторным методом (ПЦР) отсутствия коронавируса в фекалиях животных.

№AN330ЛИК, Коронавирусная инфекция кошек (FCoV)

Срок исполнения

2 дня (плюс 1 -2 дня для регионов)

Исследуемый материал

ликвор (спинно-мозговая жидкость)

Метод определения

Возбудителем энтерита (Feline coronavirus enteritis) и инфекционного перитонита (Feline Infectious Peritonitis, FIP) кошек служит одноцепочечный РНК-вирус семейства Coronaviridae (FCoV). На основании серологических и геномных отличий различают два типа: тип I FCoV- наиболее распространен, тип II FCoV встречается реже и представляет собой рекомбинантную форму между типом I FCoV и коронавирусом собак.

Коронавирус поражает домашних кошек, серопозитивными могут быть и другие виды представителей семейства кошачьих, обитающих в природе. Заболевание встречается повсеместно. Основной источник вируса фекалии зараженных животных, где патоген появляется через неделю с момента заражения. Вирус выделяется из зараженного организма кошки во внешнюю среду в течение нескольких недель, месяцев, отмечено пожизненное носительство, во время которого отмечают повышенную концентрацию патогена в кале. Вирус способен сохраняться во внешней среде один-два дня, иногда до 7 недель и передается через загрязненные лотки, обувь, одежду, руки.

Важно понимать, что у одной из девяти зараженных коронавирусом кошек может развиться FIP. К факторам, провоцирующим развитие этого прогрессирующего и, как правило, неизлечимого заболевания, относят породную принадлежность (абиссинские, австралийские дымчатые, бенгальские, бирманские, бурманские, британские короткошерстные, гималайские, рэгдол, рексы и скотиш-фолды), возраст животного до года и более 10 лет, стрессовые ситуации.

Большинство кошек, инфицированных FCoV, либо остаются здоровыми, либо заболевание проявляются в виде энтерита, протекающего в легкой форме. Первичная инфекция длится в течение 7-18 месяцев и может приводить к:

  1. выздоровлению,
  2. персистентному выделению FCoV;
  3. рекуррентному выделению FCoV.

Реинфицирование довольно часто наблюдается при совместном содержании кошек.

У котят после первичного или вторичного инфицирования достоверно чаще развиваются клинические признаки FIP, а интенсивность выделения вируса существенно выше в сравнении с взрослыми животными. Обусловленная вирусом и другими факторами иммуносупрессия способствует репликации и интенсивному выделению FECV.

Инфицирование FECV отмечают после нивелирования материнских антител у котят на 4-8 неделе жизни. Заболевание может развиться через несколько недель после инфицирования, но чаще через 6-18 месяцев. Системный воспалительный пиогранулематоз, как правило, развивается через 6-18 месяцев с момента заражения. Клинические симптомы FIP часто меняются с течением времени и зависят от поражения тех или иных органов, преобладания воспалительных либо экссудативных процессов. Характерны летаргия, отсутствие аппетита, периодическая лихорадка, не поддающаяся антибиотикотерапии, отмечают повышенную жажду и полиурию. Возможно образование плевральных или абдоминальных выпотов. На долю FIP приходится около 10% случаев перикардиального выпота у кошек, данная инфекция является третьей наиболее распространенной причиной этой патологии после кардиомиопатии и неоплазии. В некоторых случаях перикардиальный выпот может вызывать тампонаду сердца. Пиогранулематозные или гранулематозные воспалительные процессы вызывают брыжеечную лимфаденопатию, реномегалию, развитие новообразований кишечника, гепатомегалию, желтуху, пневмонию, увеит, хориоренит. У 10% кошек при FIP наблюдаются неврологические симптомы, такие как локальные и генерализованные судороги, которые вызываются преимущественно менингоэнцефалитом, менингомиелитом, эпендимитом и обструктивной гидроцефалией. В некоторых случаях отмечается выраженная анемия, вызванная иммунообусловленным гемолизом или микроангиопатией.

Окончательный диагноз при FIP ставится только на основании результата иммуногистохимического окрашивания антигена коронавируса при наличии пиогранулематозного или гранулематозного васкулита. Ввиду сложности получения биоптатов у кошек при FIP, прижизненная диагностика инфекции часто основана на данных анамнеза, результатах клинического осмотра и лабораторных исследований, а также на исключении других возможных причин болезни. Вследствие того, что образование выпотов является характерной особенностью болезни, необходимо получение соответствующих образцов и их исследование. Результаты исследования выпота более информативные, чем результаты исследования крови.

Для обнаружения FCoV были разработаны тест-системы ПЦР с обратной транскрипцией, однако они не позволяют дифференцировать вирулентные и авирулентные штаммы вируса. Поскольку авирулентные штаммы могут обнаруживаться в крови и других тканях кошек, у которых отсутствует FIP, диагностическое значение имеет обнаружение вируса лишь в желудочно-кишечном тракте. Возможно получение ложноотрицательных результатов исследования методом ПЦР при низкой концентрации вируса в исследуемом образце либо в результате разрушения вирусной РНК при длительном хранении. Для диагностики FIP клинически значимым будет являться обнаружение РНК вируса в выпотной жидкости при экссудативной форме инфекции.

Сроки исполнения: 2 дня (плюс 1 -2 дня для регионов).

Исследуемый аналит: ликвор (спинно-мозговая жидкость).

Метод исследования: ПЦР – Real-time.

  • биоматериал отбирается до введения контраста при миелографии или не ранее чем через 5 дней после проведения процедуры;
  • для проведения процедуры необходима общая анестезия;
  • в день процедуры животное не следует кормить.

Показания: атаксия, судороги, тремор, неврологический дефицит черепно-мозговых нервов, парезы и параличи.

  • пункция СМЖ является инвазивной процедурой, для нее характерны все присущие данному виду вмешательств риски;
  • процедура не проводится при повышенном внутричерепном давлении;
  • вследствие повышенного риска кровоизлияния в субарахноидальное пространство, пункцию СМЖ не проводят при тромбоцитопении.

Метод отбора биоматериала: люмбальная пункция согласно методике.

  • провести процедуру взятия ликвора.
  • После внесения биоматериала в пробирку с сиреневой крышкой (ЭДТА) осторожно перевернуть контейнер 6-7 раз для перемешивания ликвора со стабилизатором.
  • Минимальный объем жидкости, необходимый для исследования, – 1 мл.
  • Заполнить все графы направительного бланка.
  • Сохранность образца 3 дня при +2°С …+8°С.
  • Температурный режим транспортировки в лабораторию +2°С …+8°С (синий пакет).

Результаты исследования содержат информацию исключительно для врачей. Диагноз ставится на основании комплексной оценки различных показателей, дополнительных сведений и зависит от методов диагностики.

Важно! Так как ликвор является малоклеточным материалом, необходимо помнить о возможном получении ложноотрицательного результата.

Формат выдачи результата: качественный метод.

Обнаружение или не обнаружение в исследуемой пробе РНК коронавирусной инфекции кошек (FCoV).

  1. de Vries AAF, Horzinek MC, Rottier PJM, de Groot RJ. The genome organization of the nidovirales: similarities and differences between arteri-, toro-, and coronaviruses. Semin Virol 1997; 8: 33–47.
  2. Addie DD, Schaap IA, Nicolson L, Jarrett O. Persistence and trans-mission of natural type I feline coronavirus infection. J Gen Virol 2003; 84: 2735–44.
  3. Hartmann K, Binder C, Hirschberger J, et al. Comparison of differ-ent tests to diagnose feline infectious peritonitis. J Vet Intern Med 2003; 17: 781–90.
  4. Kass PH, Dent TH. The epidemiology of feline infectious peritonitis. Feline Pract 1995; 23: 27–32.
  5. Cave TA, Thompson H, Reid SWJ, Hodgson DR, Addie DD. Kitten mortality in the United Kingdom: a retrospective analysis of 274 histopathological examinations (1986–2000). Vet Rec 2002; 151: 497–501.
Оцените статью